生殖医学杂志
主办单位:国家计划生育委员会
国际刊号:1004-3845
国内刊号:11-4645/R
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    本刊论文
张家界地区某县女性泌尿生殖道标本支原体检测及体外耐药分析

导读::但引起女性泌尿生殖道感染最主要的是解脲支原体。自1962年人类利用人工培养基分离支原体获得成功后。通过对233例支原体阳性标本进行耐药性检测。
论文关键词:女性,泌尿生殖道分泌物,支原体,耐药性

  自1962年人类利用人工培养基分离支原体获得成功后,从人体分离的支原体不断被发现,现已有20多种。对人类有致病性的有3种,解脲尿原体(Uu),人型支原体(Mh),生殖支原体(Mg)。但引起女性泌尿生殖道感染最主要的是解脲支原体,人型支原体,生殖支原体;生殖支原体生长条件要求高而且生长缓慢,一般不采用经典的培养检测,而采用PCR技术。鉴于目前生殖支原体诊断技术尚不能在临床实践中广泛推荐应用,国内对于生殖支原体感染情况报道不多;所以泌尿生殖道感染标本的支原体检测一般只检测解脲支原体和人型支原体。其中解脲支原体是人类泌尿生殖道的常见病原体,与许多泌尿生殖道感染症、围产期感染和不育症等都有关系,而且还是性传播疾病的病原体之一。为了解张家界地区某县女性泌尿生殖道感染的分布和对常用抗菌药物的耐药情况,本文对2008-2010年来院就诊399例女性泌尿生殖道标本进行支原体的检测及药敏实验结果进行回顾性分析药学论文,为临床合理用药提供依据。
  1材料与方法
  1.1材料
  1.1.1研究对象 连续收集2008年-2010年来我院妇科门诊就诊的所有本地区患者399例,所有对象均为初诊患者,剔除治疗后复查者,年龄范围为10岁-78岁,患者平均年龄为28岁。
  1.1.2 实验材料 采集拭子为一次性无菌棉拭子,支原体培养鉴定和药敏试剂盒购自珠海力拓发展有限公司。
  1.2方法
  1.2.1标本采集
  标本均由专业妇科医生用无菌棉拭子轻轻抹去宫颈粘液,然后在宫颈口内约1.5mm处,轻轻旋转刮取20S,置无菌管内立即送检龙源期刊
  1.2.2 支原体检测
  将采集到的标本棉拭子插入液体培养瓶,在靠近液面上方的瓶壁上挤压旋转拭子,使拭子中标本充分渗入培养基;充分混匀接种了标本的液体培养基,然后用无菌加样器取100ul加入试剂条的各孔中,同时分别设阴,阳性对照;最后各孔滴加2滴无菌矿物油,盖上试剂条盖,置于35摄氏度孵箱培养;24h和48h时分别观察结果。
  1.2.3结果判定
  各测试孔中培养基为橙黄色为阴性,培养基由橙黄变红且清亮为阳性,表示有支原体生长;药敏结果判读,如果Uu阳性含有药物的孔中培养液的颜色为橙黄色,则表示Uu对此抗菌药物敏感;反之,表明耐药;若某种抗菌药物低浓度培养液变为红色,而高浓度培养液为黄色,表明该抗菌药物高浓度对Uu的生长有抑制作用,低浓度对Uu的生长无抑制作用,即中度敏感。
  1.3数据统计
  计数资料采用检验,P<0.05有统计学意义;统计软件为SPSS13.0 。
  2结果
  2.1支原体培养鉴定结果 
  399份标本共检出支原体阳性233例,阳性率为58.4%。其中单一UU感染为49.9%(199/399);单一Mh感染为1.2%(5/399 );Uu和Mh混合感染为7.3%(29/399 )。在检出的233例阳性标本中,单一的Uu 感染为85.4%(199/233);单一Mn感染为 2.1%(5 /233 );Uu和Mh混合感染为12.5%(29/233 )。2008年-2010年的支原体阳性检出率分别是50%(70/139);56.2%(73/130);69.2%(90/130);其中单一Uu的感染分别为67.1% (47/70);84.9%(62/73 );92.2% (83/90 );单一的Mh的感染分别是8.6%(6/70 ); 5.5% (4/73 );2.2%(2/90 );Uu和Mh混合感染分别是24.3%(17/70 );9.6%(7/73 );5.6%(5/90 ) 。其中Uu的感染比例在逐年增加。这三种类型的感染主要集中在20-30岁这一年龄段的女性药学论文,支原体阳性感染率为62.2%(145/233),构成比为36.3%(145/399)。 结果见表1-2和图1-2。
  表1 女性泌尿生殖道支原体检出率(%)
  Table 1 The detection of femaleurogenital mycoplasma
  


 

Uu

Mh

Uu+Mh

合计

阳性/例

199

5

29

233

阳性率/%

85.4

2.1

12.5

100

构成比%

49.9

1.2

12.5

58.4

表2 2008-2010年女性泌尿生殖道支原体检出率(%)
  

年度

Uu

Mh

Uu+Mh

2008年

67.1(47/70)

8.6(6/70)

24.3(17/70)

2009年

84.9(62/73)

5.5(4/73)

9.6(7/73)

2010年

92.2(83/90)

2.2(2/90)

5.6(5/90)

The detection of female urogenital mycoplasma from 2008 to 2010
  table2泌尿生殖道分泌物泌尿生殖道分泌物
  图1各年龄段女性泌尿生殖道支原体检出情况
  Fig.1 The detection of urogenatilmycoplasma in different age women 
  泌尿生殖道分泌物
  图22008-2010各年度女性泌尿生殖道支原体检出情况
  Fig.2 The detection of urogenatilmycoplasma from 2008 to 2010 
  2.2支原体耐药分析,通过对233例支原体阳性标本进行耐药性检测,发现对常用的12种抗菌药物都有不同程度的耐药。耐药率较高的分别是诺氟沙星,氧氟沙星,红霉素,耐药率分别是91.8%,80.2%,75.9%;敏感率较高的分别是强力霉素,交沙霉素,克拉霉素,敏感率分别是85.8%,80.7%,75.1%。结果见表2。
  表2 233株支原体药敏检测结果
  Table2 Drug sensitivtyresult to antibiotics of 233 Mycopiasma strains
  

抗菌药物

敏感(%)

中介(%)

耐药(%)

四环素

18.5 (43/233)

16.7 (39/233)

64.8 (151/233)

氧氟沙星

5.6 (13/233)

14.2 (33/233)

80.2 (187/233)

红霉素

9.9 (23/233)

14.2 (33/233)

75.9 (177/233)

强力霉素

85.8 (200/233)

3.0 (7/233)

11.2 (26/233)

交沙霉素

80.7 (188/233)

5.6 (13/233)

13.7 (32/233)

斯帕沙星

24.0 (56/233)

15.0 (35/233)

61.0 (142/233)

罗红霉素

24.9 (58/233)

15.0 (35/233)

60.1 (140/233)

美满霉素

73.0 (170/233)

6.0 (14/233)

21.0 (49/233)

左氧氟沙星

15.9 (37/233)

17.2 (40/233)

66.9 (156/233)

克拉霉素

75.1 (175/233)

6.4 (15/233)

18.5 (43/233)

阿奇霉素

16.7 (39/233)

22.7 (53/233)

60.6 (141/233)

诺氟沙星

3.0 (7/233)

5.2 (12/233)

91.8 (214/233)

3讨论
  支原体是一类原核细胞微生物,体型极其细小 ,介于细菌与病毒之间, 但是在泌尿生殖道炎症中有近30%的炎症由它引起。近年来,女性泌尿生殖道支原体感染在我国呈上升趋势,已成为非淋球菌性泌尿生殖道感染(NGU)的重要病原菌。研究表明,Uu和Mh感染与人类自发性流产,NGU,新生儿体重不足,育龄妇女不孕不育等多种泌尿生殖道疾病关系密切[1]
  早在1993年Blanchard A[2]就曾提出 ,女性妊娠后,由于孕激素的增加,抑制了细胞免疫,机体抵抗力下降,更容易受到支原体的感染,支原体引起的围产期感染已成为现代产科面临的新问题。支原体可以经胎盘垂直传播或由孕妇下生殖道感染上行扩散药学论文,引起宫内感染,两者均可导致流产、早产、胎儿宫内发育迟缓、低体重儿、胎膜早破,甚至造成胎死宫内等一系列不良后果龙源期刊。支原体感染常见的合并症为输卵管炎,造成女性生殖器官病理性改变,引发不孕不育等不良结局。本研究显示,所有检测标本中,支原体的总感染率为58.4%,和赵胜等[12]的报道,对疑为泌尿生殖道女患者支原体感染阳性率58.8%非常接近。而感染支原体的类型以解脲支原体(Uu)为主,在所有的阳性标本中这一类支原体的感染达到85.4%,与国内外有关报道有一定差异[3,4]。人型支原体Mh的感染只占2.1%,而Uu和Mh的混合感染率为12.5%,与国内有关报道有一定差异[1,4,7,9] 。研究表明,Uu感染的患者,除引起泌尿生殖道的炎症外,还可从多方面损害人体的生育能力,导致后天性不育症[6],人类生殖健康是正常生育的基本保证。当生殖健康受到威胁时就有可能发生一系列的疾病。支原体的产生就是由生殖系统感染所可能引发一系列的疾病。也是导致夫妇不孕不育的常见因素。在不孕不育患者中,支原体感染率明显高于有正常生育能力者。 
  本研究还发现女性患者的感染年龄主要集中在20-30岁这一年龄段,这一年龄段患者占所有阳性感染的62.2%。其主要原因可能是这一年龄段的女性正处于性活跃期,性活动的频繁可能扩大支原体的传播,因此加强对此年龄段女性的监测和健康知识宣传能有效地降低感染率,预防支原体感染的传播,有效控制和降低对这一年龄段妇女的危害性。支原体还是一种可以通过性接触传播的疾病,也存在间接性感染,因此,夫妇双方重视性卫生药学论文,杜绝不洁性生活,对预防支原体感染具有十分重要的意义。
  支原体是目前所能发现的能在无生命培基中生长繁殖的最小的微生物。由于支原体特殊的末端结构使其能牢固地粘附于靶细胞表面,与其致病性密切相关,其主要传播途径为性传播和母婴传播,Uu的降解产物可使阴道的PH值升高,有利于其他细菌的繁殖和感染;支原体菌体大小介于细菌和病毒之间,无细胞壁,能在无生命的培养基中生长繁殖的最小原核型微生物。因缺乏细胞壁结构,且形态呈多形性,对抑制细胞壁合成的药物如青霉素,头孢菌素等B-内酰胺类抗菌药物类药物天然不敏;临床上常采用抑制蛋白合成的药物或DNA合成的药物如大环内酯类、四环素类、氯霉素类和喹诺酮类抗菌药物作为治疗支原体感染的首选抗菌药物。但是由于近年来,抗菌药物的不合理使用,导致支原体对这些抗菌药物的耐药性呈现逐年上升趋势,而且不同地区,抗菌药物使用的习惯不同,支原体表现的耐药表型也不尽相同[8]。本实验的药敏结果分析显示,该县女性支原体感染对常用的12种抗菌药物均有不同程度的耐药性,其中喹诺酮类抗菌药物表现出较高的耐药率,如诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星耐药率分别是91.8%、80.2%、66.9%,与国外有关文献Uu对氧氟沙星敏感报道不符[9]。大环内酯类抗菌药物红霉素、罗红霉素、阿奇霉素的耐药率分别是75.9%、60.1%、60.9%;而对第一代大环内酯类抗菌药物交沙霉素的耐药率较低,耐药率只有13.7%,可能与其特殊的分子结构对诱导性耐药菌仍具有抗菌活性,不易产生耐药性有关[4,8],这表明各类型的支原体感染耐药性有差异,使用大环类脂类抗菌药物对其治疗应有针对性;而四环素类抗菌药物的耐药率达到64.8%,与国内有关报道不一致[10]龙源期刊。其中强力霉素和交沙霉素对支原体感染的耐药率较低,分别只有11.2%和13.7%。因此强力霉素和交沙霉素可作为本地区支原体感染治疗的首选药物,由此可见本地区要慎用氟喹诺酮类抗菌药治疗Uu感染。本地区药敏结果与国内相关报道有一定差异[3,4]。这提示可能由于各地用药习惯不同,导致不同耐药性的支原体被选择出来。通过本地区支原体感染分析药敏结果还发现,对Uu敏感的抗菌药物,对Mh感染的病例和混合感染(Mh+Uu)病例也有较高的敏感性药学论文,但混合感染(Mh+Uu)的耐药性明显增强。在233株阳性菌株中,有11株支原体对12种抗菌药物耐药,占4.7%;217株支原体对2种或2种以上抗菌药物产生耐药,占93.1%。这进一步提示,多重耐药支原体已经成为本地区支原体感染的主要病原体。多重耐药支原体的增多主要是因为对疾病的诊疗过程中,存在不合理用药现象,临床根据经验用药,导致耐药菌株的增加,应该引起高度关注。因此,检验科微生物室工作人员应提高对泌尿生殖道支原体的培养及药敏检测,临床依据药敏结果选择敏感药物,是提高支原体治疗效果,避免耐药菌株产生的重要途径。而有效预防和控制支原体感染或其他致病微生物的检测及监测其耐药性的变迁,具有十分重要的意义。
    综上所述,本地区20-30岁女性支原体感染主要以解脲支原体(Uu)为主,敏感性最好的药物为强力霉素,交沙霉素和克拉霉素;而诺氟沙星,氧氟沙星,红霉素应根据药敏结果选用。

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